肠杆菌科细菌是院内感染的常见致病菌， 主要包括枸橼酸杆菌、阴沟肠杆菌、黏质沙雷菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌等[1]。近年来随着免疫抑制剂的应用范围扩大，抗菌药物的应用范围增加，导致细菌耐药情况越发严重[2]。肠杆菌科大肠埃希菌、产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌、耐碳青霉烯类抗菌药物的出现以及产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶菌株比例的提高导致临床在抗菌方面治疗难度显著增加[3-4]，这些药物的不合理应用，使得在某些医院某些特殊的菌种会造成流行，如果能够检测这些相应的耐药的流行菌种，可以根据其实际的情况，合理的在医院进行抗生素的规划使用，从而降低院内感染的发生情况，为此急需相应的耐药性监测。基于此，本研究对2017～2019年葫芦岛市中心医院（以下简称“我院”）的耐耐碳青霉烯肠杆菌科细菌耐药性监测结果进行分析，对近年来我院发生院内耐碳青霉烯肠杆菌科细菌感染情况以及耐药情况进行探究，现报道如下。

选取2017年1月～2019年12月我院检验科分离出的肠杆菌科细菌9220 株作为研究对象。纳入标准：①所有菌株均为肠杆菌科细菌；②确定送检的菌株符合采集标准。排除标准：①菌株来源为同一患者同一部位；②在采样过程中疑似感染的标本。标本来源包括胸水、腹水、引流液、胆汁、分泌物、导管尖端、尿液、血液、痰。本研究经过医院医学伦理委员会批准。

1.2.1 材料与仪器项目 菌株来源为我院2017～2019年经美国BD 公司提供的Phoenix100 全自动细菌鉴定/药敏系统及配套试剂、英国Oxoid 公司提供的药敏纸片、温州康泰生物科技有限公司提供的替加环素Etest 试条、纸片扩散法（K-B 法）药敏平板以及菌株分离培养平板对临床标本进行分离的肠杆菌科细菌中对碳青霉烯类抗菌药物不敏感菌株，菌株均由温州市康泰生物科技有限公司提供。质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC25923、铜绿假单胞菌ATCC27853、大肠埃希菌ATCC25922。以肺炎克雷伯菌ATCC BAA-1706为改良Hodge 试验阴性对照菌， 以肺炎克雷伯菌ATCCBAA-1705 为改良Hodge 试验阳性对照菌株。

1.2.2 试验方法 采用EDTA 协同试验、改良Hodge 试验、纸片扩散法（K-B 法）联合Phoenix-100 全自动细菌鉴定/药敏系统对我院2017～2019年分离出的肠杆菌科细菌进行药敏试验。其中Phoenix-100 全自动细菌鉴定/药敏系统以及K-B 法试验是进行药敏试验，E-test 法是进行替加环素药敏试验， 以2016年美国临床实验室标准化研究协会推出的M100-S26 文件中相关判读标准进行敏感与耐药判读。以该标准判读作为耐碳青霉烯肠杆菌科细菌的初步筛选根据，即该菌株对于厄他培南最小抑制浓度（MIC）超过2 μg/mL或美罗培南或亚胺培南的MIC 超过4 μg/mL。通过改良的Hodge 试验对于可疑菌株进行确证试验，对金属β-内酰胺酶应用双纸片协同试验筛查。

分析2017～2019年我院的耐碳青霉烯肠杆菌科细菌检出情况、分布情况及耐药情况。

采用SPSS 20.0 统计学软件进行数据分析， 计数资料用率表示，组间比较采用χ2 检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2017年1月～2019年12月共分离出肠杆菌科细菌9220 株，其中耐碳青霉烯肠杆菌科细菌菌株510株，检出率5.53%。2017年、2018年、2019年三年检出率分别为32.55%、34.51%及32.94%， 差异无统计学意义（χ2=0.439、0.441、0.453，P>0.05）（表1）。

510 株耐碳青霉烯肠杆菌科细菌菌株中的标本最主要来源为痰382 株（74.90%），2019年168 株耐碳青霉烯肠杆菌科细菌菌株中的标本来源为痰的占比低于2018年、2017年，差异有统计学意义（χ2=4.320，P＜0.05）（表2）。

2017～2019年耐碳青霉烯肠杆菌科细菌菌株对我院常用抗菌药物美罗培南、亚胺培南、氨曲南、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢他啶、头孢唑林、哌拉西林/三唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦全部耐药，对替加环素以及多黏菌素敏感（表3）。

第一株产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌是2001年由美国北卡罗来纳州首次报道，后诸多地区以及国家也对此类菌株进行了相应的报道[5]。我国在2006年浙江杭州对一株产KPC-2 型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌进行了首次报道[6]。目前，此类菌株主要分布的地区为美洲、地中海地区以及欧洲，随着抗生素滥用情况的加重，此类病株被检出的概率呈逐年递增趋势[7-9]。

对我院2017～2019年耐碳青霉烯肠杆菌科细菌菌株分离情况进行分析，三年间共分离出肠杆菌科细菌9220 株，其中耐碳青霉烯肠杆菌科细菌菌株510株，总检出率为5.53%。2017年、2018年、2019年三年检出率分别为32.55%、34.51%及32.94%，这与钟秀君等[10]的研究结果相似。药敏试验结果表明，2017～2019年耐碳青霉烯肠杆菌科细菌菌株对我院常用抗菌药物美罗培南、亚胺培南、氨曲南、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢他啶、头孢唑林、哌拉西林/三唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦全部耐药，对替加环素以及多黏菌素敏感，这与张嫘等[11-14]的研究结果相似。结合菌株分离情况以及耐药情况进行分析，目前临床对细菌感染性疾病的主要采用抗菌药物为β-内酰胺类抗菌药物， 其中以阿米卡星为代表[15-16]。本研究发现，该药物虽对肠杆菌科细菌具有一定的敏感性， 但该药物具有较高的肾、耳毒性，故应在给药时慎重、酌情给药，应结合药敏试验结果，选择替加环素、多黏菌素等药物进行用药。这一研究结果表明，对于临床一线医生而言，应该积极进行药敏结果的筛查， 减少经验性的广谱抗生素的应用，防止形成抗生素耐药的超级菌产生。

本研究还发现，510 株耐碳青霉烯肠杆菌科细菌菌株中的标本最主要来源为痰，382 株（74.90%）。提示呼吸道感染者感染此类菌株的概率较大，这可能与呼吸道感染者需要接受长期气管插管治疗有关，且患者自身免疫力较弱，大量的抗生素用药会导致耐药菌的存在增加。而2019年168 株耐碳青霉烯肠杆菌科细菌菌株中的标本来源为痰的占比低于2018年及2017年，差异有统计学意义（P＜0.05）。提示我院已针对感染情况采取了相应的预防措施，但总感染率并未发生改变可能与近年来疾病种类检出增多有关，同时也提示应该积极加强预防措施，在检验技术不断更新的情况下，给临床一线提供更为精准的治疗方案。

综上所述，随着医疗技术的不断发展，耐碳青霉烯肠杆菌科细菌检出率逐年增加，且均以高度耐药的形式呈现，临床需对其感染过程进行深入探究，以探究更有效的防控措施。

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Analysis of the surveillance results of carbapenem-resistant Enterobacteriaceae drug resistance in Huludao Central Hospital from 2017 to 2019

ZHANG Man-jia
Department of Clinical Laboratory, Huludao Central Hospital, Liaoning Province, Huludao 125000, China

[Abstract]Objective To analyze the monitoring resistance results of carbapenem-resistant Enterobacteriaceae in Huludao Central Hospital. Methods The carbapenem Enterobacteriaceae bacteria detection, distribution and drug resistance were tested using EDTA collaborative test, modified Hodge test, Kirby-Bauer method (KB method) combining with Phoenix-100 full-automatic bacterial identification/drug susceptibility system in Huludao Central Hospital from January 2017 to December 2019. Results From January 2017 to December 2019, a total of 9220 strains of Enterobacteriaceae bacteria were isolated, of which 510 were carbapenem Enterobacteriaceae, and the total detection rate was 5.53% (510/9220). The three-year detection rates in 2017, 2018, and 2019 were 32.55%(166/510), 34.51%(176/510)and 32.94%(168/510), respectively, and the difference was not statistically significant (P>0.05). Among 510 carbapenem Enterobacteriaceae, the main specimen was sputum, accounting for 74.90% (382/510). The other specimen sources were 3 strains from pleural fluid specimens (0.59%), 5 from bile specimens (0.98%), 7 from secretions specimens (1.37%), 9 from ascites specimens (1.76%), 11 strains from drainage fluid specimens (2.16%), 20 strains from urine specimens(3.92%), 22 strains from catheter tip specimens (4.31%), 51 from blood specimens (10.00%). From 2017 to 2019, the bacterial strains of carbapenem Enterobacteriaceae resisted against the commonly used antibacterial drugs such as Meropenem, Imipenem, Aztreonam, Cefepime, Cefotaxime, Ceftazidime, Cefazolin, Piperacillin/Trizobacte, and Cefoperazone/Sulbactam. The strains were sensitive to Tigecycline and polymyxin. Conclusion The infection rate of carbapenem Enterobacteriaceae in the hospital is relatively high. The most common strain is Klebsiella pneumoniae, which is resistant to most antibacterial drugs. It is resistant to Tigecycline, Polymyxin, Cotrimoxazole, Amikacin, and Gentamicin to a certain degree. When choosing drugs in clinic, the corresponding antibacterial drugs should be selected based on the actual situation.

[Key words]Carbapenem Enterobacteriaceae; Monitoring of bacterial resistance; Source distribution; EDTA synergy test; Modified Hodge test; Kirby-Bauer method; Phoenix-100 full-automatic bacterial identification/drug sensitivity system

[中图分类号]R446.1

[文献标识码]A

[文章编号]1674-4721（2021）4（c）-0154-04

（收稿日期：2020-10-15）