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丙型肝炎是临床一种为丙型肝炎病毒（HCV）感染所致的肝脏疾病，相关数据统计显示目前全球近1.8亿人感染HCV，感染率在3%左右，同时每年仍有近3.5万新发者，临床发病率呈上升趋势［1-2］。此病早期症状不明显，发病隐蔽，不易发觉，可通过吸毒、输血、针刺等方式传播，可致肝脏纤维化、坏死，并逐渐发展为肝硬化、肝癌等，危及患者生命安全［3-4］。早期有效诊断疾病对控制HCV传播、丙肝防治有重要意义，因此如何有效诊断早期丙肝感染得到临床关注，肝功能指标（ALT、TBil）在一定程度上能反映肝脏病理情况，而检测血清中HCV相关指标有助于疾病的早期诊断、治疗［5］。本研究观察296例丙肝高危感染风险者以丙型肝炎核心抗原（HCV-cAg）、丙肝抗体（抗-HCV IgG）、ALT、TBil检测检查诊断情况，旨在为后期临床疾病的早期检出提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

将2015年2月～2017年5月医院各科室有丙肝高危感染风险的296例患者作为观察对象，所有患者怀疑为丙肝感染高危者，其中男158例，女138例；年龄 21～71 岁，平均（45.3±4.8）岁。所有患者均行 HCV-cAg和抗-HCV、ALT、TBil检查。

1.2 试剂、仪器、方法

血清提取方法：所有观察对象于清晨空腹取肘静脉血5 ml，放于抗凝管中保存，随后送检，对样血进行离心处理，参数：3000 r/min，时间为10 min，取血清置于低温冰箱中保存，检验时提前从冰箱中取出放置至复温。

试剂、仪器：FC酶标仪（美国Thermo公司）、洗板机Wellwash型（美国Thermo公司）、电热恒温水浴箱（深圳汇松）、加样器（芬兰百得）、荧光定量PCR仪（型号7500美国ABI公司）、全自动生化分析仪（型号7600日立）、BY-R18高速冷冻离心机（北京白洋医疗器械有限公司）；HCV IgG试剂盒购自英科新创（厦门）科技有限公司，HCV-cAg采用山东莱博生物科技有限公司，ALT试剂盒由北京利德曼生化股份有限公司提供，TBil试剂盒由北京利德曼生化股份有限公司提供。

方法：HCV-cAg，以ELISA法检测，设置阴性、空白对照、阳性孔，并按试剂盒说明进行操作，质控品采用自制低值质控品，同时本次截止值为阴性对照孔平均值+0.10，OD值测定选择主波450 nm、副波630 nm进行比色。抗-HCV IgG检测：以ELISA法检测，设置阴性、空白对照、阳性各两孔，所有操作严格按照试剂盒说明进行，室内质控品由英科新创提供，室间质控品由卫生部临床检验中心提供，本次截止值为阴性对照孔平均值+0.12，本次OD值测定选择主波450 nm、副波630 nm进行比色。肝功能检测：以全自动生化分析仪对血清ALT值测定，采用终钒酸盐氧化法对TBil进行测定，严格按照试剂盒说明进行。HCV-RNA检测：采用RT-PCR法测定，以全自动荧光定量PCR仪进行检测，严格按照试剂盒说明进行操作。

1.3 观察指标

以HCV-RNA检测结果为金标准，观察各组患者的HCV感染情况，分析HCV-cAg、抗-HCV IgG联合用于疾病检测的临床价值。其中HCV IgG检测以OD值 S/COV≥1为阳性，S/COV＜1为阴性；HCV-cAg检测，OD值大于或等于cut off值为阳性，OD值小于cut off值为阴性；HCV-RNA检测以病毒载量103拷贝/ml以下为阴性，103～105拷贝/ml为少量复制，106～107拷贝/ml为病毒中量复制，108拷贝/ml以上病毒大量复制，同时以HCV-RNA检测阳性表示患者确诊丙肝［6-7］。ALT参考值：5～50 U/L；TBil参考值：1.71～17.10 μmol/L。诊断率=（真阴性+真阳性）例数/总例数×100%；特异度=真阴性例数/（假阳性+真阴性）例数×100%；敏感度=真阳性例数/（真阳性+假阴性）例数×100%。

1.4 统计学方法

采用统计学软件SPSS 19.0分析数据，计量资料以均数±标准差（

±s）表示，采用 t检验；计数资料以率表示，采用χ2检验；相关性采用Pearson相关性分析方法，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HCV-RNA含量与ALT、TBil水平的相关性

HCV-RNA含量与ALT水平成正相关（r=0.978，P＜0.05），HCV-RNA 含量与 TBil水平无相关性（r=-0.681，P＞0.05）（表 1）。

表1 HCV-RNA含量与ALT、TBil水平的相关性

2.2 不同检测方式检出率的比较

296 例患者行HCV-RNA检查，阳性55例，抗-HCV IgG方法的检出38例，检出率为69.1%，HCV-cAg方法检出48例，检出率为87.3%，检测肝功能法检出32例，检出率为58.2%，三者比较，差异有统计学意义（χ2=11.663，P＜0.05）。

2.3 联合检查方法检出率的比较

抗-HCV IgG、HCV-cAg联合检测53例，检出率为96.5%，HCV-cAg联合血清肝功能检测50例，检出率为90.9%，抗-HCV IgG联合血清肝功能检测41例，检出率为74.5%，三者比较，差异有统计学意义（χ2=12.768，P＜0.05），可见，抗-HCV IgG、HCV-cAg 联合检出率最高。

2.4 不同检查方法诊断价值的比较

诊断率：联合＞HCV-cAg＞抗-HCV IgG＞血清肝功能，特异度：联合＞抗-HCV IgG组＞HCV-cAg组、血清肝功能组，敏感度：联合＞HCV-cAg＞抗-HCV IgG＞血清肝功能，具体见表2。

表2 不同检查方法诊断价值的比较[%（n/N）]

3 讨论

丙肝发病隐匿症状不明显，故疾病早期诊断主要依据临床实验室检查结果，HCV-RNA检查是目前临床疾病诊断的金标准，但其检查价格昂贵，耗时较长，故不适用于早期丙肝感染筛选，同时患者感染后HVC抗体转阳一般需要近70 d的窗口期，因此如何选择有效的检查方式准确诊断疾病得到临床医师的关注［8］。ALT、TBil作为肝功能的重要指标，有学者发现只要有1%肝细胞坏死便可导致人体血液中ALT水平升高，ALT、TBil水平能有效反映患者的肝脏损害情况。临床认为，丙型肝炎患者由于病毒感染肝功能会受影响，故而将ALT、TBil用于疾病诊断。本研究中，HCV-RNA含量与ALT水平成正相关（r=0.978，P＜0.05），HCV-RNA 含量与 TBil水平无相关性（P＞0.05），血清肝功能组检测阳性与HCV-RNA相符32例，确诊率为58.2%，提示ALT、TBil用于诊断丙肝感染存在一定的误诊情况，分析原因部分HCV对肝脏的损害具有隐匿性，导致早期未有肝细胞坏死、肝脏损害情况发生，同时个体免疫应答也会造成ALT水平异常，故感染检出率不高［9］。

抗-HCV IgG、HCV-cAg检查是目前疾病常见的检测手段，且近几年以ELISA法检测，检查敏感性提高，但鉴于患者感染后抗-HCV IgG出现时间较晚，窗口期时间较长，故临床仍存在漏诊情况，因此有学者提出联合检查，以提高疾病早期检出率［10-11］。本研究中，以HCV-RNA检查阳性为标准，抗-HCV IgG组检出率为69.1%，HCV-cAg组为82.3%，血清肝功能组为58.2%，HCV-cAg方法的检出率高于抗-HCV IgG、血清肝功能检查方法（P＜0.05）；同时不同检查方式联合诊断的检出率比较，差异有统计学意义（P＜0.05），且抗-HCV IgG、HCV-cAg联合检出率最高为96.5%；抗-HCV IgG、HCV-cAg诊断价值高于单指标检查，提示HCV IgG、HCV-cAg联合检查诊断准确率较高，在陈伟岳等［12］学者的研究结果指出HCV-cAg和HCVRNA检测结果符合率为94%，提示HCV-cAg有良好的灵敏度，用于HCV感染检测，检出率高，与本研究结果相符，同时学者研究中有3例抗-HCV阴性而HCV-cAg检查呈阳性，且后期跟踪患者3周后抗-HCV IgG转阳，其认为HCV-cAg能较抗-HCV先检测到HCV感染。HCV-RNA作为病毒复制的直接标志，人体HCV感染后HCV-RNA阳性出现比抗-HCV早约50 d，但其检查设备复杂、人配备要求高，且受多种因素影响［13］。而HCV-cAg作为HCV感染后早期可出现的敏感指标，窗口期一般在2周左右，其血清转阳仅比HCV-RNA迟1～2 d，且操作相对简单，设备要求较易满足［14］。本研究结果提示抗-HCV IgG、HCV-cAg联合检查能有效将HCV感染的窗口期提前，从而更早发现感染，有效提高临床疾病检出率，这对疾病早诊断、早治疗有重要意义［15］。

综上所述，HCV-cAg、抗-HCV IgG联合用于HCV早期感染诊断，临床检出率高，可在临床推广应用。

［参考文献］

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