全自动尿液分析仪复检规则的建立
李 勍 1，2 王 飞 1，2 韩竖霞 1，2
1.湖北省中医院检验科，湖北武汉 430061；2.湖北省中医药研究院，湖北武汉 430064
[摘要]目的 制定由迪瑞H-800尿干化学分析仪和IRIS IQ-200尿有形成分分析仪组成的全自动尿液分析工作站的复检规则，并验证该规则在临床中的应用效果。方法 使用该工作站对1715份标本进行检测，同时对每份标本进行尿沉渣人工显微镜检测。通过对两种方法检测结果的分析，制定本实验室的尿液分析工作站复检规则，并用300份标本进行验证。结果 通过对1715份标本的检测，以人工镜检结果为标准，该尿液分析工作站检测结果的假阴性率为1.22%，假阳性率为2.97%，复检率为33.41%。应用制订的复检规则对临床标本验证结果的假阴性率为1.33%，假阳性率为1.66%，复检率为35.33%。结论本实验室制定并验证了全自动尿液分析工作站复检规则，其假阴性率、假阳性率、复检率均能满足要求，该复检规则可以应用于临床工作中。
[关键词]尿液分析；IRIS IQ-200；复检规则
[中图分类号]R446.12
[文献标识码]A
[文章编号]1674-4721（2018）9（b）-0161-03
[作者简介]李勍（1974-），女，湖北武汉人，硕士，副主任技师，研究方向：生物化学检验
Establishment of re-examination rules for automatic urine analyzer
LI Qing1,2 WANG Fei1,2 HAN Shu-xia1,2
1.Department of Clinical Laboratory,Hubei Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine,Wuhan 430061,China;2.Hubei Institute of Traditional Chinese Medicine,Wuhan 430064,China
[Abstract]Objective To establish a re-examination rule for the automatic urine analysis workstation consisting of Derry H-800 urine dry chemical analyzer and IRIS IQ-200 urine forming analyzer,and to verify the application of this rule in the clinic.Methods A total of 1715 specimens were tested by using this workstation.At the same time,each specimen was examined by urine sediments microscopic examination.Through the analysis of the test results of two methods,re-examination rules of the laboratory′s urine analysis workstation were developed and validated with 300 specimens.Results The results of the microscopic examination were taken as standards based on the examination of 1715 specimens.The false negative rate of the test results of urine analysis workstation was 1.22%,the false positive rate was 2.97%,and the re-examination rate was 33.41%.The results of the clinical specimen validation by the application of the re-examination rules were as follows:the false negative rate was 1.33%,the false positive rate was 1.66%and the re-examination rate was 35.33%.Conclusion The laboratory has developed and validated the re-examination rules for automated urine analysis workstation.The false negative rate,false positive rate and re-examination rate all can meet the requirements.This re-examination rule can be applied in clinical practice.
[Key words]Urine analysis;IRIS IQ-200;Re-examination rules
尿液分析作为重要的医学实验室常规检验项目之一，在临床疾病的诊断和治疗中有着非常重要的用途。近年来，随着医学实验室尿液分析自动化程度越来越高，很多检验工作者对仪器的依赖也越来越大。而在实际工作中，很多因素可以导致仪器结果出现假阳性或者假阴性。因此，建立适合自己实验室的尿液分析复检规则是很有必要的。本研究使用的仪器是由迪瑞H-800尿干化学分析仪和IRIS IQ-200尿有形成分分析仪组成全自动尿液分析工作站。本研究制定该工作站复检规则遵循以下原则：①保证假阴性率尽可能的低；②在降低假阴性率的前提下降低假阳性率；③在满足原则①、②的前提下，尽量降低复检率，以便临床报告时限（turn-around time，TAT）尽可能的缩短。
1 资料与方法
1.1 标本来源
收集2017年3月湖北省中医院住院的2015份患者尿液标本进行考察，其中男1123份，女892份，年龄1 ～88岁，每份标本20 ml。其中的1715份标本用于制定规则，300份标本用于验证规则。以上标本涵盖本院住院部所有病房，包括肾病内科、泌尿外科等。
1.2 仪器与试剂
长春迪瑞H-800尿干化学分析仪及其配套试纸条；美国国际遥控影像集团公司（IRIS）的IQ-200尿有形成分分析仪、配套试剂及IQ质控/调焦液（批号475-0060）；尿沉渣检测离心管、离心机、OLYMPUS显微镜；Fast Read-10尿沉渣计数板。IQ-200尿有形成分分析仪严格按照仪器说明书进行调焦、质控、样本检测。
1.3 方法
1.3.1 样本检测 所有样本先用迪瑞H-800尿干化学分析仪及IQ-200尿有形成分分析仪检测，IQ-200尿有形成分分析仪的结果经有经验的检验技师进行识别修饰。同时将10 ml标本进行人工显微镜镜检，于2 h内检测完毕。人工镜检法按《全国临床检验操作规程》（第4版）[1]推荐的尿沉渣离心沉淀检查法，准确量取新鲜尿10 ml，以相对离心力400 g条件下离心5 min。离心后，一次性吸弃上清尿液，留取离心管底部液体约0.2 ml。充分混匀，取适量滴入Fast Read-10尿沉渣板。管型以低倍（10×10）镜视野全片至少20个视野所见的平均值报告；细胞以高倍（10×40）镜视野至少10个视野所见的最低至最高数的范围报告。每份标本采用双盲法报告结果（2名经验丰富的主管技师操作）。
1.3.2 阳性判断标准 红细胞、白细胞、透明管型超过参考范围上限，或者出现病理性管型时，均为阳性。尿液干化学分析仪的RBC、WBC和PRO以“+/-”为弱阳性，“+ ～++++”为阳性。IQ-200尿有形成分分析仪的参考范围为厂家提供由本实验室验证通过：①RBC：≤10 个/μl （男），≤13 个/μl （女）； ②WBC：≤12 个/μl（男），≤20 个/μl（女）；③CAST：≤0.5 个/μl。显微镜镜检有形成分参考范围根据文献[2]提供由本实验室验证通过，参考范围如下：①RBC：0 ～4 个/HP（男），0 ～9 个/HP（女）；②WBC：0 ～5 个/HP（男），0 ～12 个/HP（女）；③CAST：0 ～偶见/LP。
1.3.3 复检规则的建立 遵循前言中提及的建立复检规则的原则，本实验室建立以下复检规则：对照尿干化学结果和IQ-200尿有形成分分析仪图像修饰后结果，在干化学弱阳性或者阳性时，IQ-200尿有形成分分析仪结果不相符者应进行镜检，即尿蛋白阳性（+ ～++++）对应管型阴性；隐血弱阳性或者阳性（+/- ～+++）对应尿红细胞阴性；白细胞弱阳性或者阳性（+/- ～+++）对应尿白细胞阴性，出现以上情况时应进行镜检。IQ-200尿有形成分分析仪结果阳性，而尿干化学结果阴性应镜检。尿沉渣图片模糊不清、不易辨认的需镜检。肾病科及泌尿科患者无论结果如何均应镜检。与患者病情不符，临床医生提出要求者需镜检。
1.3.4 复检规则的评估 运用复检规则，对300例验证标本进行分析，计算假阳性率、假阴性率及复检率。
2 结果
2.1 本实验室尿液分析工作站复检规则的假阴性结果
全自动尿液分析工作站干化学检查弱阳性或阳性，尿沉渣阴性共53例标本进入复检规则被正确检出，即仪器结果阴性，人工镜检结果为阳性（假阴性）。其中红细胞干化学弱阳性或阳性15例，白细胞干化学弱阳性或阳性9例，管型干化学阳性29例（表1）。
表1 本实验室尿液分析工作站复测规则的假阴性结果（例）

2.2 本实验室尿液分析工作站复检规则的假阳性结果
全自动尿液分析工作站干化学阴性，尿沉渣阳性共106例标本进入复检规则被正确检出，即仪器结果阳性，人工镜检结果为阴性（假阳性）。其中红细胞干化学阴性36例，白细胞干化学阴性45例，管型干化学阴性25例（表2）。
表2 本实验室尿液分析工作站复检规则的假阳性结果（例）

2.3 本实验室尿液分析工作站的复检率
在1715份标本的检测过程中，有32份标本的图片模糊不清、不易辨认，需要显微镜镜检，其占全部标本的1.87%（32/1715）。综合2.1及2.2中通过复检规则的标本数据及以上32份标本，应用复检规则后，得到整体复检率为 33.41%[（344+197+32）/1715]。
2.4 未进入复检规则标本的实际假阴性率和假阳性率
另有21例假阴性标本未进入复检规则，被漏检，即干化学及沉渣结果均阴性，人工镜检为阳性的标本21例，故本研究制定的复检规则应用后的假阴性率为1.22%（21/1715）。同理，另有51例假阳性标本未进入复检规则，故本研究制定的复检规则应用后的假阳性率为 2.97%（51/1715）。
2.5 验证实验结果
应用300份标本验证本实验室制定的复检规则，假阴性标本4例，假阴性率：1.33%；假阳性标本5例，假阳性率：1.66%；共复检106例，复检率：35.33%。
3 讨论
IQ-200尿沉渣分析仪采用平面流式细胞技术、高速摄影成像、自动粒子识别技术的测定原理，通过尿液中有形成分的外形等特性对每种微粒成分进行分类，其特异性、敏感性较高，这是IQ-200自动化的优点[3]。本研究选取的1715份标本中，有21份标本未进入复检规则为假阴性，假阴性率是1.22%，其中有12份为白细胞漏检，研究进一步通过瑞氏染色发现其中有8份标本中的白细胞为淋巴细胞，另外9份标本为红细胞漏检；这21份标本中的细胞镜检结果均<18个/HP，无1例肾病漏检。51份标本为假阳性，假阳性率为2.97%，其中既有结晶、真菌孢子误认为红细胞和白细胞，也有黏液丝误认为管型的。
在第一阶段实验，即1715份标本的检测中，复检规则中未纳入“肾病科及泌尿科患者都应镜检”这一条，而在第二阶段验证实验时采用了这条复检规则，最终导致假阳性率有所下降，而复检率有所上升。
目前应用于临床实验室的检测尿液有形成分的自动化设备主要有两种，一种是以SYSMEX UF系列为代表的尿流式细胞分析系统，另一种是以IRIS IQ-200为代表的机器视觉尿有形成分分析系统。这两种不同检测原理的仪器各有利弊[4]。本研究使用的仪器是由迪瑞H-800尿干化学分析仪和IRIS IQ-200尿有形成分分析仪组成全自动尿液分析工作站，应用复检规则后假阴性率为1.33%，而其他机器视觉尿有形成分分析系统的研究在应用复检规则后的假阴性率为 1.07%[5]、0.8%[6]、0.75%[7]，尿流式细胞分析系统的研究在应用复检规则后的假阴性率为1.34%[8]，1.3%[9]。本研究在制定尿液分析的复检规则时，要求假阴性率尽量小，但到底小到什么程度为宜却没有明确规定[10-12]，不同研究者在制定尿液分析复检规则时，均采用血液分析复检规则中要求的假阴性率<5%[13-15]。本研究结果提示，相对于血液分析复检而言，尿液分析复检耗时更少，镜检操作更便捷，临床工作中应该更严格地制定复检规则，提高复检率，进而降低假阴性率。
综上所述，尿液分析复检规则的假阴性率必须<2%才能应用于临床实验室。
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（收稿日期：2018-05-30 本文编辑：孟庆卿）