溶血标本对生化检验结果的影响
李秋馨
广州市番禺区沙湾人民医院,广州 511483
[摘要]目的探讨溶血标本对生化检验结果的影响。方法选择我院2015年1~6月60名体检者作为研究对象,将其随机分为实验组、对照组,实验组使用人工方法将血液溶血,作为溶血标本,对照组试管里的血液不采用任何方法,作为正常标本。检测两组血清中的ALP、AST、ALT、LDH、CK、BUN、GLU、CHOL、TG、K+、Cr、UA等12项生化检验指标。结果实验组的血清ALP、AST、ALT、LDH、CK、CHOL、K+测定结果明显高于对照组(P<0.05),两组的BUN、GLU、TG、Cr、UA测定结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论溶血标本对生化检验结果均有一定的影响,在检验过程中应尽可能地采取一些措施以避免溶血标本的出现,若已出现溶血标本,可以采用空白样品以便减少对检测结果的影响,必要时可以重新采集新鲜血清。
[关键词]溶血标本;生化检验;影响
近几年来,临床诊疗对生化检验结果的准确性越来越重视。患者检验结果的准确度与仪器的精密度、系统偏差以及干扰等因素有密切的关系。由于各种各样的全自动分析器械使用的标准化及普遍化,生化检验的偶然误差、系统误差都得到很好的控制。其中,干扰对生化检验结果的影响被广泛关注,尤其是溶血[1]。溶血标本是生化检验中最常见的影响结果的因素,主要是由于在检验中未按照操作规程实时操作、采血不当,甚至是试管不清洁等[2]。有研究显示,温度以及反应时间也可能会影响生化检验结果[3]。本研究探讨溶血标本对生化检验结果的影响,现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择我院2015年1~6月60名体检者作为研究对象,年龄19~45岁,平均(35.42±10.23)岁;男27名,女33名。将其随机分成实验组、对照组。两组在性别构成、年龄、文化水平等方面差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.2 方法
依次从60名体检者中抽取6 m1血液,平均放入两支试管中,每支试管的血液为3 m1。实验组:使用人工方法将血液溶血,25℃下分离,30min后,1100r/min,离心10 min,取1 m1的分离血清作溶血标本备用[4];对照组:试管里的血液不采用任何方法,血清自然分离,在相同的条件下离心,取1 m1的分离血清作正常标本备用。
1.3 观察指标
检测两组血清中的碱性磷酸酶(ALP)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、尿素氮(BUN)、葡糖糖(GLU)、总胆固醇(CHOL)、三酰甘油(TG)、钾离子(K+)、肌酐(Cr)、血尿酸(UA)等12项生化检验指标,其步骤均严格按照试剂盒操作说明书进行。使用迅达903分析仪和配套的试剂测定K+,每一份溶血血清、正常血清一共需要进行10次测定,取其平均值,分别计算60例标本的各项指标其测定的平均值。
1.4 统计学处理
使用SPSS 10.0软件对数据进行分析,计量资料采用t检验,计数资料采用x2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
实验组血清ALP、AST、ALT、LDH、CK、CHOL、K+的测定结果明显高于对照组(P<0.05);两组BUN、GLU、TG、Cr、UA的测定结果差异无统计学意义(P>0.05)(表1)。
表1 两组血清12项生化指标测定结果的比较(±s)
3 讨论
溶血主要包括体内溶血和体外溶血,其中造成体内溶血的因素主要是药物的毒性反应、生物因素(包括疟疾等)、物理因素(包括血管手术等)、配血不合适导致的输血反应;造成体外溶血的因素主要有化学因素(包括血样接触了活性剂)、代谢因素(包括遗传疾病导致血细胞增加)、物理因素(包括冷冻等)[5-7]。引起标本溶血的原因主要有:①采血过程中,体检者的血管不很清晰,导致不能顺利进行静脉穿刺采血;若使用一次性的注射器采样后,再注射到促凝的采血管中时,会导致血液在注入试管中时产生大量气泡,管内压力增大造成溶血。②标本在运输以及混匀的过程中出现较大的震荡。③强力地震荡血液或者剥离血液凝块。④使用留置针采样也是造成标本溶血最常见的原因。体外溶血可通过样品制备技术的标准化加以克服,在采血过程中需严格按照操作技术规范来执行[8-9]。①采血器具必须干净、清洁;②注射针头不可使用乙醇对其消毒;③止血带不能扎太久、太紧;④血液注入试管不宜太快,以免血泡过多引起血细胞破裂;⑤血液不能放进冷冻室,避免血液融化后引起溶血;⑥血液存放时间不可太长,主要是防止其他物质甚至是消毒液流入标本,对检验结果造成影响;⑦血液标本采取后,需尽早将血清自然分离出来,室温放置在30 min~1 h内可以分离血清;⑧若标本在离心前自行凝集,不可以用器物剥离;⑨离心时间控制在5~10 min,转速控制在1000~1200 r/min;⑩为提高结果的准确性,若条件许可,溶血标本可以重新采集等。细胞内液中某些物质如ALP、AST、ALT、LDH、CK、K+、CHOL等的含量是细胞外液中浓度的22~160倍,只要轻微溶血就会造成检测结果明显的变化,另外,血红蛋白可干扰胆固醇的酶法测定[10]
本研究结果显示,溶血标本的ALP、AST、ALT、LDH、CK、CHOL、K+的测定结果明显高于正常标本(P<0.05),而溶血对BUN、GLU、TG、Cr、UA的测定结果影响不大,主要原因:红细胞中,ALP、AST、ALT、LDH、CK、CHOL、K+等浓度较高的物质进入血清中。其中红细胞内LDH的活性是血浆中的180倍,AST、ALT、CK分别是血浆中的38、7、15倍,造成了分析的浓度比实际浓度高,因此结果偏高[11-13]。溶血对BUN、GLU、TG、Cr、UA的测定结果影响不大,原因是:①这些生化指标受溶血的影响不大[14-15];②正负干扰相互抵消(血红蛋白对吸光度的增加属于正干扰;溶血导致的稀释作用属于负干扰)[16-17]
总之,溶血标本对生化检验结果均有一定的影响,需要检验工作者对溶血标本有深入的掌握及了解,在检验过程中应尽可能地采取一些措施以避免溶血标本的出现,若已出现溶血标本,可以采用空白样品以便减少对检测结果的影响,必要时可以重新采集新鲜血清,这对确保提高生化检验指标的准确性有非常重要的意义。
[参考文献]
[1]罗祖军,邹德学,王强,等.标本溶血对生化检验结果的干扰和影响及对策研究[J].重庆医学,2014,43(22):2879-2880,2883.
[2]梁惠强,牛映红,梁佩婵,等.溶血因素对血清蛋白电泳结果的影响分析[J].现代预防医学,2011,38(5):939-940,947.
[3]王进,金静芬.外周静脉不同采血方法对急诊血标本溶血的影响[J].中华护理杂志,2011,46(9):848-851.
[4]秦仕英.儿童血标本溶血原因分析与干预措施[J].激光杂志,2011,32(5):91-92.
[5]贾波,靳十周,李晓雪,等.标本溶血对ABO和Rh血型鉴定的影响[J].中国输血杂志,2011,24(12):1065-1066.
[6]丁红霞,吴秀梅,杨其贤.新生儿溶血样本对检验结果的影响及新生儿采血技术探讨[J].护士进修杂志,2011,26 (3):267-268.
[7]龙跃兵,朱伟斌,章美燕.溶血对生化检验结果准确性的影响及校正方法的探讨[J].广东医学,2011,32(12):1562-1563.
[8]张琼丽.新生儿溶血标本对检验结果的影响及新生儿采血技术探讨[J].中华医院感染学杂志,2011,21(22):4719-4720.
[9]何星,黄小明.溶血标本在ELISA二步法中对HBsAg测定结果的影响[J].中国输血杂志,2013,26(9):900-902.
[10]孙召东,王然,吴惠毅,等.溶血对两种发光免疫分析法检测心肌肌钙蛋白I结果的影响[J].临床检验杂志,2012,30(4):303-304.
[11]彭海维,方宗君,杨容,等.血标本放置时间和方式对9项生化指标检测结果的影响[J].中国全科医学,2010,13 (30):3427-3428.
[12]王月影,郭欣,文成伟.溶血对电化学发光法测定胰岛素的影响[J].江苏医药,2008,34(6):639.
[13]傅银锋,周惠娜,巢浩界.妇科肿瘤患者血液微量元素的检测及意义[J].山东医药,2009,49(33):87-88.
[14]刘建栋,李永哲,李宁,等.血液蛋白质组与质谱仪检测流程标准化初探[J].基础医学与临床,2007,27(2):193-197.
[15]沈云峰,胡远贵.溶血对电化学发光免疫分析法测定胰岛素的干扰[J].检验医学,2007,22(3):359-360.
[16]李宁霞,李健,魏星,等.不同离心条件与凝血检验结果的关系[J].军医进修学院学报,2006,27(2):84.
[17]刘志峰,李大磊,李春梅,等.血清标本溶血对大鼠血液生化指标的影响[J].毒理学杂志,2006,20(6):392-393.
Influence of hemolysis sPecimen on biochemical test result
LI Qiu-xin
Shawan Peop1e's Hospita1 in Panyu District of Guangzhou City,Guangzhou 511483,China
[Abstract] Objective To exp1ore the inf1uence of hemo1ysis specimen on biochemica1 test resu1t. Methods From January to June 2015,60 peop1e for physica1 examination were se1ected as research object and they were random1y divided into experimenta1 group and contro1 group.In experimenta1 group,artificia1 method was used to conduct b1ood hemo1ysis, and the b1ood was used as a hemo1ysis specimen,whi1e contro1 group,b1ood in test tube did not give any method,and the b1ood was used as a norma1 specimen.The biochemica1 detection indexes of serum a1ka1ine phosphatase (ALP),aspartate transaminase (AST),a1anine aminotransferase (ALT),1actate dehydrogenase (LDH),creatine kinase (CK),b1ood urea nitrogen (BUN),g1ucose (GLU),cho1estero1 (CHOL),trig1yceride (TG),K+,creatinine (Cr),and uric acid (UA) and so on was tested between two groups respective1y. Results In experimenta1 group,the test resu1t of serum ALP,AST,ALT,LDH,CK, CHOL,and K+was obvious1y higher than that in contro1 group (P<0.05).There was no statistica1 difference of the test resu1t of BUN,GLU,TG ,Cr,UA between two groups (P>0.05). Conclusion The hemo1ysis specimen has a certain inf1uence on the biochemica1 test resu1t.In the process of detection,some measures are conducted as much as possib1e to avoid hemo1ysis.If hemo1ysis occurs,b1ank samp1e can be substituted aiming at reducing inf1uence on test resu1t.If necessary, fresh serum can be reco11ected.
[Key words] Hemo1ysis specimen;Biochemica1 test;Inf1uence
收稿日期:(2015-12-01本文编辑:许俊琴)
[中图分类号] R446.11+2 
[文献标识码] A 
[文章编号] 1674-4721(2016)03(c)-0135-03