铜绿假单胞菌的临床分布及耐药性分析
刻郁
锦州市中心医院检验科,锦州 121000
[摘要]目的了解锦州市中心医院铜绿假单胞菌的临床分布及耐药情况,为临床治疗铜绿假单胞菌感染提供参考依据。方法本院2014年1月1日~2015年12月15日应用VITEK-2鉴定系统对分离出的铜绿假单胞菌进行细菌鉴定和药敏分析,采用WHONET 5.6软件对药敏结果进行统计分析。结果共分离出铜绿假单胞菌325株,主要标本来源为痰液,共检出236株,占72.6%,其次是尿液34株(10.5%)。主要分布科室为呼吸内科,检出119株,占36.6%以及重症监护室,检出58株,占17.8%,其次是神经内科34株(10.5%)。主要抗菌药物的药敏情况为对阿米卡星的敏感率为77.1%,对头孢曲松、复方新诺明的敏感率均<10%,对多种抗菌药物均有不同程度的耐药。结论本院临床分离的铜绿假单胞菌主要来源于痰液标本,多分布于呼吸内科和重症监护室,其中对阿米卡星的敏感率最高。
[关键词]铜绿假单胞菌;耐药性;临床分布
铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PAE)是一种非发酵革兰氏阴性杆菌,是专性需氧菌,是一种常见的条件致病菌,广泛存在于自然界如土壤、水源中,也存在于人类的皮肤、肠道、呼吸道中。当机体抵抗力下降或进行侵入性治疗如导尿、气管插管、呼吸机等,容易引起化脓性的炎症以及全身感染[1-2]。由于PAE对抗生素的敏感率低,耐药率高,现已经成为医院感染的主要致病菌[3-4]。多年来的临床经验表明,单一的抗菌药物对大多数革兰氏阴性杆菌尤其是PAE的治疗效果相当不理想,用药不久就会出现耐药性导致治疗失败。PAE的高耐药性给临床医生的治疗带来了极大的困难,而多重耐药的PAE以及泛耐药的PAE给临床抗感染治疗更是带来了巨大的挑战[5]。为了能及时掌握PAE的临床分布及耐药情况,更好地指导临床合理用药,本研究对本院临床分离的PAE进行耐药性分析,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 菌株来源
选取2014年1月1日~2015年12月15日本院住院患者送检的各类标本:痰液、尿液、咽拭子、血液、伤口分泌物等,共分离出PAE 325株,同一患者多次送检同一部位标本分离出的相同菌株不重复计算在内。
1.2 仪器与试剂
使用法国生物梅里埃公司生产的全自动微生物分析仪VITEK-2 COMPACT,M-H琼脂培养基购自英国Oxoid公司。
1.3 方法
细菌分离培养参照《全国临床检验操作规程》第3版进行操作,采用VITEK-2 COMPACT全自动微生物鉴定系统进行菌株鉴定及药敏分析,参照美国临床实验室标准化协会(C1inica1 and Laboratory Standards Institute,CLSI)推荐的判断标准[6]以敏感(S)、中介(I)、耐药(R)报告结果。
1.4 质控菌株
质控菌株为PAE ATCC27853,购自我国原卫生部临床检验中心。
1.5 统计学分析
采用微生物实验室数据管理软件WHONET 5.6对药敏结果进行统计分析。
2 结果
2.1 菌株来源分布
325 株PAE主要来自痰标本,占72.6%,其次是尿液标本,占10.5%,伤口分泌物占8.0%。其他标本类型所占比例较低,分别是咽拭子占5.8%,血液及其他占3.1%(表1)。
表1 325株PAE的来源分布
2.2 菌株的临床科室分布
本院PAE主要分布在呼吸内科(36.6%)、重症监护室(17.8%),其次是神经内科(10.5%)、内分泌科(8.6%),另外神经外科(7.1%)、肿瘤科(4.6%)、胸外科(3.4%)等其他科室均有检出(表2)。
表2 325株PAE的科室分布
2.3 药敏分析结果
PAE对阿米卡星的耐药率最低,为13.8%,其次依次为妥布霉素、亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、庆大霉素,耐药率分别为28.6%、30.5%、31.1%、35.6%。头孢曲松的耐药率最高,为948%,其次为复方新诺明(91.3%)(表3)。
表3 325株PAE的耐药性分析(%)
3 讨论
PAE是重要的条件致病菌,当免疫力下降时极易侵入机体导致疾病,在我院主要病原菌的检出中居于第二位,仅次于大肠埃希菌,与陆婷婷等[7]的报道一致。在非发酵菌中,PAE的检出率居于首位。
我院分离的PAE主要来源于痰液、尿液以及伤口分泌物标本,其中以痰液所占比例最高,提示呼吸系统对PAE的易感性最强。PAE的多糖荚膜能够抵抗吞噬细胞的吞噬作用,并且使之极易黏附在囊性纤维化和慢性呼吸道疾病患者的呼吸道和肺泡表面,引起呼吸道感染[8]。PAE在伤口分泌物中分离率较高,提示应该加强创伤部位感染的控制。从科室分布来看,呼吸内科和重症监护室的感染率明显高于其他科室,这主要是由于这些病区感染的大多是免疫力低下者、老年人并且多患有严重基础疾病、长期应用呼吸机以及气管插管等各种侵入性的操作、长期应用多种广谱抗菌药物,给PAE的侵入造成了机会。
PAE的耐药机制非常复杂,可由单一耐药机制引起,也可多种耐药机制共存[9],既存在天然耐药,也存在获得性耐药、选择性耐药[10]。PAE的主要耐药机制包括产生由染色体或质粒介导的β-内酰胺酶,产生氨基糖苷类钝化酶和金属酶等抗菌活性酶;青霉素结合蛋白和DNA旋转酶等发生结构的改变,改变了抗菌药物作用的靶位;膜微孔蛋白编码基因的缺失或丧失,导致外膜通透性下降[11],这是PAE特有的一种膜通道蛋白,其只允许亚胺培南进入菌体发挥抗菌作用,当发生改变时亚胺培南进入菌体受阻,产生特异性耐药;糖蛋白构成的富有黏附性的生物被膜能逃避宿主的免疫作用;主动外排泵基因的过度表达[12-13]。从表3可以看出,我院PAE对头孢曲松、复方新诺明的耐药率分别为94.8%、91.3%,均>90%,故不建议在本院使用这两种药治疗PAE引起的感染。氨基糖苷类抗生素中PAE对阿米卡星的耐药率最低,为13.8%,这可能与阿米卡星对细菌产生的钝化酶比较稳定有关。另外,PAE对氨曲南、左旋氧氟沙星、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南等均有不同程度的耐药。
综上所述,PAE的耐药情况日趋严峻,给临床治疗带来了极大的困难。针对PAE的临床分布特征,加强重点科室的预防和控制,医务人员应严格按照消毒技术规范进行操作,严格执行手卫生,加强病房消毒,重视感染患者的隔离,切断传播途径,避免交叉感染,有效控制菌株播散[14-16]。要及时监测PAE对常用抗菌药物的耐药性,合理选用抗菌药物,减少耐药菌株的产生,提高医疗质量。
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Clinic distribution and drug resistance of Pseudomonas aeruginosa
LIU Yu
Department of C1inica1 Laboratory,Jinzhou Centra1 Hospita1,Jinzhou 121000,China
[Abstract] Objective To understand the c1inica1 distribution and drug resistance of Pseudomonas aeruginosa in Jinzhou Centra1 Hospita1,and to provide reference basis for c1inica1 treatment of Pseudomonas aeruginosa infection. Methods January 1,2014 to December 15,2015,Pseudomonas aeruginosa iso1ated form our hospita1 was given bacteria1 identification and drug sensitivity ana1ysis using VITEK-2 identification system,and the drug sensitivity resu1t was statistica11y ana1yzed by WHONET 5.6 software. Results 325 strains of Pseudomonas aeruginosa were iso1ated,the main source of sputum samp1e (236 strains),and it accounted for 72.6%,fo11owed by the urine of 34 strains (10.5%).The main distribution department was department of respiratory interna1 medicine,119 strains (36.6%) were detected and intensive care unit,the detection of 58 strains (17.8%),fo11owed by the department of nerve interna1 medicine [34 strains (10.5%)].Main antibacteria1 drug susceptibi1ity was sensitive rate to amikacin was 77.1% ,susceptibi1ity rate to ceftriaxone and trimethoprim su1famethoxazo1e were 1ower than 10%,to a variety of antibacteria1 drugs showed different degree of resistance. Conclusion C1inica1 iso1ated Pseudomonas aeruginosa main1y from sputum samp1e,and it distributes main1y in the department of respiratory interna1 medicine and intensive care unit,which is the highest sensitivity of amikacin.
[Key words] Pseudomonas aeruginosa;Drug resistance;C1inica1 distribution
收稿日期:(2015-12-21本文编辑:许俊琴)
[作者简介]刘郁(1983-),女,主管检验师,主要从事临床微生物检验工作
[中图分类号] R446.5 
[文献标识码] A 
[文章编号] 1674-4721(2016)03(c)-0126-03